白书龙嘴上说着让杨舟试一试,心里却是想着等杨舟遇到挫折,就劝他更改课题,反正都说了给杨舟半年时间。
要是现在就泼冷水,那就是打自己的脸了。
接下来白书龙果然很配合杨舟,主动询问需要用到什么器材,需要多少经费。
他来帮着协调。
杨舟计算过经费,最大的开销便是蛋白酶。
也就是用于基因编辑的Cas9蛋白(Cas9核酸酶)。
RISPR/Cas9是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统。
CRISPR/Cas9系统通过将入侵噬菌体和质粒DNA的片段整合到CRISPR序列中,并利用相应的CRISPRRNAs(crRNAs)来指导Cas9蛋白对同源序列降解,从而提供免疫性。
人工改造过的Cas9/sgRNA系统通过sgRNA(shortguideRNA)引导Cas9蛋白识别并剪切带有sgRNA靶点的双链DNA,就可以用于基因敲除和精确编辑DNA等操作。
不管是动物和植物,都有DNA结构,那就可以用Cas9技术。
如果将DNA看成是一卷老式胶片,其中有一段胶片想要剪切掉,那就可以用Cas9蛋白酶,替代掉这段胶片,原来的胶片就失效了,而DNA链条,也会因此而断裂。
在DNA链断裂后,CRISPR/Cas9有两个选择,要么直接添加碱基,破坏原有基因功能,通过沉默基因实现基因敲除,要么利用单链DNA模板,引入新的序列,对基因进行编辑。
同样是DNA胶片,转基因相当于用另一卷胶片,硬生生地卡在原有的胶片上,让原有的胶片,表现出不同的画面。
转基因大豆,就是让大豆的DNA片段添加上矮牵牛的抗性基因,因为矮牵牛的抗性基因具备抵抗除草剂草甘膦的能力,这就可以让转基因大豆不被除草剂杀死,而杂草全部会被除草剂灭杀。
这就是两者的区别。
严格来说,转基因也是基因编辑的一种,Cas9基因剪辑在做减法,转基因则是在做加法。
杨舟目前准备用的就是减法。
想要实现减法也不是那么容易的,因为基因剪辑的蛋白酶也需要设计,其中最关键的一点便是获取带有sgRNA靶点的双链DNA。
Cas9是一个剪辑器,比如剪辑萝卜的基因,那总要知道该剪辑哪一段。
现在不少实验室有设计Cas9的业务,剪辑器的费用也有所不同,有的成功率低,价格就便宜,有的成功率高,价格就比较昂贵。
按照10微克计算,价格在1500元到15000元之间,数量不同价格也有所区别。
杨舟选择在赛默飞世尔科技公司订购,这是一家全球实验仪器器
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